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M1)株と同様な生育特性及び鉄輸送活性を示した変異株は、Δslr0327（futB; M2）、Δsll1878Δslr0327（ΔfutCΔfutB; M5）、Δslr1295Δslr0513(ΔfutA1ΔfutA2; M6）であった。この結果と推定アミノ酸配列の解析結果から、これら４つの遺伝子が単一の三価鉄輸送体をコードしていると推定された。また、Δslr1392(feoB; M10)株は、生育特性は野生株と同じだがアスコルビン酸で化学的に還元した二価鉄の輸送活性が明らかに低下していることが示された。したがってPCC 6803は二価鉄輸送体を持っており、slr1392(feoB）が膜貫通領域とABC領域を持つサブユニットをコードしていることが示された。また、ssr2333がslr1392(feoB)と共転写されることから、E．coliのfeoA遺伝子の相同体であろうと考えられた。これらの結果とRT-PCR法によるmRNA発現パターンの解析から、本ラン藻は三価鉄輸送体（Fut輸送体）に加えて二価鉄輸送体（Feo輸送体）を持ち、Fut輸送体は通常のBG-11培地上で発現し、鉄欠乏ストレスによって発現量が増加すること、またFeo輸送体は鉄欠乏ストレスに応答して発現することが示された。さらにATP合成阻害剤を用いた実験から、どちらの鉄輸送体もATP加水分解エネルギーを必要とするABC型輸送体であることが示された。また、各種金属による輸送活性阻害実験から両輸送体はそれぞれ三価鉄あるいは二価鉄に対する親和性が高いことが示された。\u003cbr /\u003e\u003cbr /\u003e３．鉄輸送体タンパク質FutA1の鉄結合活性の解析\u003cbr /\u003e　バクテリアのABC型輸送体は一般に基質結合タンパク質を必要とする。推定アミノ酸配列からfutA1/A2がFut輸送体の鉄結合タンパク質サブユニットをコードすると推定された。そこで、リコンビナントFutA1タンパク質（rFutA1）を作製して分光学的手法によりFutA1の鉄結合活性を解析した。溶液中で鉄と結合したrFutA1は波長453nmに吸収のピークを持つスペクトルを示し、鉄イオンとrFutA1タンパク質がモル比1：1で結合することが示された。rFutA1の鉄に対する会合定数はクエン酸を競合剤として用いた実験条件下でおよそ1×10\u003cSUP\u003e19\u003c/SUP\u003e程度と見積もられた。アミノ酸一次配列の比較からFutA1およびFutA2はH. influenzaeの鉄結合タンパク質HitAとよく似た機構で鉄イオンを配位することが推定された。これらの結果からFut輸送体はHit/Fbpファミリーに属する高親和性のフリー鉄イオン輸送体であることが明らかになった。\u003cbr /\u003e　培地中のクエン酸は細胞の鉄輸送活性および生育に複雑な影響を与えることが示された。これはPCC 6803の鉄輸送機構においてFut及びFeo輸送体以外の他の因子の関与を示唆するものであり、更なる解析が必要とされた。", "subitem_description_type": "Other"}]}, "item_1_description_18": {"attribute_name": "フォーマット", "attribute_value_mlt": [{"subitem_description": "application/pdf", "subitem_description_type": "Other"}]}, "item_1_description_7": {"attribute_name": "学位記番号", "attribute_value_mlt": [{"subitem_description": "総研大乙第98号", "subitem_description_type": "Other"}]}, "item_1_select_14": {"attribute_name": "所蔵", "attribute_value_mlt": [{"subitem_select_item": "有"}]}, "item_1_select_8": {"attribute_name": "研究科", "attribute_value_mlt": [{"subitem_select_item": "生命科学研究科"}]}, "item_1_select_9": {"attribute_name": "専攻", "attribute_value_mlt": [{"subitem_select_item": "X2 分子生物機構論専攻"}]}, "item_1_text_10": {"attribute_name": "学位授与年度", "attribute_value_mlt": [{"subitem_text_value": "2001"}]}, "item_1_text_20": {"attribute_name": "業務メモ", "attribute_value_mlt": [{"subitem_text_value": "（2018年2月16日）本籍など個人情報の記載がある旧要旨・審査要旨を個人情報のない新しいものに差し替えた。承諾書等未確認。要確認該当項目修正のこと。"}]}, "item_creator": {"attribute_name": "著者", "attribute_type": "creator", "attribute_value_mlt": [{"creatorNames": [{"creatorName": "KATO, Hirokazu", "creatorNameLang": "en"}], "nameIdentifiers": [{"nameIdentifier": "9512", "nameIdentifierScheme": "WEKO"}]}]}, "item_files": {"attribute_name": "ファイル情報", "attribute_type": "file", "attribute_value_mlt": [{"accessrole": "open_date", "date": [{"dateType": "Available", "dateValue": "2016-02-17"}], "displaytype": "simple", "download_preview_message": "", "file_order": 0, "filename": "乙98_要旨.pdf", "filesize": [{"value": "298.7 kB"}], "format": "application/pdf", "future_date_message": "", "is_thumbnail": false, "licensetype": "license_11", "mimetype": "application/pdf", "size": 298700.0, "url": {"label": "要旨・審査要旨 / Abstract, Screening Result", "url": "https://ir.soken.ac.jp/record/1368/files/乙98_要旨.pdf"}, "version_id": "b9995c47-631f-4ee3-86ac-1967fc512909"}, {"accessrole": "open_date", "date": [{"dateType": "Available", "dateValue": "2016-02-17"}], "displaytype": "simple", "download_preview_message": "", "file_order": 1, "filename": "乙98_本文.pdf", "filesize": [{"value": "9.3 MB"}], "format": "application/pdf", "future_date_message": "", "is_thumbnail": false, "licensetype": "license_11", "mimetype": "application/pdf", "size": 9300000.0, "url": {"label": "本文", "url": "https://ir.soken.ac.jp/record/1368/files/乙98_本文.pdf"}, "version_id": "96a72ce7-499a-4eb7-90be-1084f4292654"}]}, "item_language": {"attribute_name": "言語", "attribute_value_mlt": [{"subitem_language": "jpn"}]}, "item_resource_type": {"attribute_name": "資源タイプ", "attribute_value_mlt": [{"resourcetype": "thesis", "resourceuri": "http://purl.org/coar/resource_type/c_46ec"}]}, "item_title": "ラン藻の鉄輸送機構の研究", "item_titles": {"attribute_name": "タイトル", "attribute_value_mlt": [{"subitem_title": "ラン藻の鉄輸送機構の研究"}]}, "item_type_id": "1", "owner": "1", "path": ["27"], "permalink_uri": "https://ir.soken.ac.jp/records/1368", "pubdate": {"attribute_name": "公開日", "attribute_value": "2010-02-22"}, "publish_date": "2010-02-22", "publish_status": "0", "recid": "1368", "relation": {}, "relation_version_is_last": true, "title": ["ラン藻の鉄輸送機構の研究"], "weko_shared_id": 1}