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/\u003e与えると、傷口の周りにERボディが誘導される。この傷害により誘導されるERボディを\u003cbr /\u003e誘導型ERボディと名付けた。\u003cbr /\u003e　恒常型ERボディは、生体防御に関与する例が多く知られているβグルコシダーゼである\u003cbr /\u003ePYK10タンパク質を内部に蓄積することに加え、誘導型ERボディは傷害、食害、ジャスモ\u003cbr /\u003eン酸メチル処理によって誘導されることから、ERボディの植物体内における機能は生体防\u003cbr /\u003e御に関与すると考えられる。本研究では、傷害誘導と菌感染の二つを用いて、総合的なER\u003cbr /\u003eボディの機能を明らかにすることを目的とした。\u003cbr /\u003e　第1章では傷害誘導を用いた誘導型ERボディの解析を行った。まず、ERボディの数に\u003cbr /\u003e着目し、誘導型ERボディが多く誘導される条件を検討した。その結果、小胞体をGFPで可\u003cbr /\u003e視化した野生株(GFPh植物体)の発芽9日目の子葉組織を用いると、傷害後66時間でER\u003cbr /\u003eボディの数が明確に増加することを見いだした。GFPh植物体の子葉の片方にのみ傷害を与\u003cbr /\u003eえたところ、傷害を与えた子葉(locally-wounded cotyledon)のERボディの数が4倍以上\u003cbr /\u003eに増加するとともに、傷害を与えていない子葉(systemically-wounded cotyledon)のER\u003cbr /\u003eボディの数も5倍以上に増加した。GFPh植物体の子葉に傷害を与えた66時間後に定量PCR\u003cbr /\u003eを行った結果、恒常型ERボディの主な内容物であるPYK10の発現量は変わらず、そのホモ\u003cbr /\u003eログであるBGLU18の発現が誘導されることが判明した。これらの結果より、恒常型と誘導\u003cbr /\u003e型ERボディの内容物は異なることが明らかとなり、それぞれのERボディが異なった機能\u003cbr /\u003eを果たしていることが示唆された。\u003cbr /\u003e　第2章では\u003ci\u003ePseudomonas syringae\u003c/i\u003e pv.  tomato(Pst) DC3000(avrRpm1)接種によって誘\u003cbr /\u003e導されるシロイヌナズナの過敏感反応系および罹病性病原菌PstDC3000(vector)を用いて、\u003cbr /\u003e植物の防御機構とERボディ内容物PYK10タンパク質の関わりを検討した。本研究では、子\u003cbr /\u003e葉の次に発生する2枚のロゼット業をNo.1, 2とし、以降の葉は発生の順に番号(leaf\u003cbr /\u003enumber、以後leaf No. とする)をつけ、それぞれの葉における防御応答を詳しく調べた。\u003cbr /\u003e植物では本葉、特にNo.7以降の葉での防御機構はよく調べられているが、それ以前の葉\u003cbr /\u003e(No. 1-6)の防御機構は調べられていない。Leaf  No. ごとに抵抗性が異なっているのでは\u003cbr /\u003eないかと考えた。\u003cbr /\u003e　そこで本研究では、過敏感反応を起こさない\u003ci\u003ePst DC3000(vector) \u003c/i\u003eおよび過敏感反応を起\u003cbr /\u003eこす\u003ci\u003ePst DC3000(avrRpml\u003c/i\u003e)接種によって誘導されるシロイヌナズナの防御応答を調べ、ER\u003cbr /\u003eボディが存在するGFPh植物体と存在しない\u003ci\u003enail\u003c/i\u003e変異株を比較することで、ERボディおよ\u003cbr /\u003eびPYK10と植物の生体防御機構の関連を明らかにすることを目的とした。ERボディおよび\u003cbr /\u003ePYK10が蓄積しない\u003ci\u003enail、pyk10\u003c/i\u003e変異体に\u003ci\u003ePst\u003c/i\u003eDC3000(\u003ci\u003eavrRpm1\u003c/i\u003e)を接種した。接種後3日目\u003cbr /\u003eの菌数を測定した結果、GFPh植物体と比較して\u003ci\u003enail\u003c/i\u003e変異体では菌数が顕著に増加してい\u003cbr /\u003eた。\u003ci\u003ePst DC3000(avrRpm1\u003c/i\u003e)は接種によって過敏感反応を引き起こすので、この生菌数の差と\u003cbr /\u003e細胞死の関連を、細胞死の指標となるイオン漏洩伝導率の経時変化および感染12時間後の\u003cbr /\u003eトリパンブルー染色を行い調べた。\u003ci\u003ePst\u003c/i\u003eDC3000(\u003ci\u003eavrRpm1\u003c/i\u003e)接種後のGFPh植物体と\u003ci\u003enail\u003c/i\u003e変異\u003cbr /\u003e株では、すべてのleaf No.においてイオン漏洩伝導率およびトリパンブルー染色に差がみ\u003cbr /\u003eられなかった。これらの結果よりPYK10は過敏感細胞死に直接関係ないことが明らかにな\u003cbr /\u003eった。\u003cbr /\u003e　また、\u003ci\u003ePst\u003c/i\u003eDC3000(\u003ci\u003eavrRpm1\u003c/i\u003e)接種後の第7葉をもちいて、ERボディの内容物であるPYK10\u003cbr /\u003eの発現を定量PCRを用いて調べたところ、未接種と比較して約80倍に発現が上昇していた。 \u003cbr /\u003e以上の結果からPYK10が細胞死に非依存的な抵抗性に関与していることが示唆された。\u003cbr /\u003e　本研究では、傷害誘導および菌感染の手法を用いた解析より、ERボディは植物の生体防\u003cbr /\u003e御に深く関わっていることが示唆された。", "subitem_description_type": "Other"}]}, "item_1_description_7": {"attribute_name": "学位記番号", "attribute_value_mlt": [{"subitem_description": "総研大甲第1252号", 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