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PCRにより、チクビヒドラ（Hydra　magnipapillata）からcDNAの単離を試みた結果、vasa類縁遺伝子を含むDEADボックスRNAへリカーゼをコードすると推定される遺伝子が8つと、nanos類縁遺伝子と考えられるcDNAの断片を2つ得ることができた。これらのうち、vasaの類縁遺伝子と考えられるCnvas1（Cnidarian　vasa1）とCnvas2、マウスではオスの生殖細胞で発現していることが知られているPL10に近縁なCnPL10、nanos類縁遺伝子と考えられるCnnos1（Cnidarian　nanos1）、Cnnos2の5つについて、まず、全翻訳領域を含むと推定されるcDNA配列を明らかにした。Cnvas1、Cnvas2、CnPL10、Cnnos1およびCnnos2のcDNAはそれぞれ797aa、890aa、627aa、248aaおよび308aaのORFを持つと推定された。配列をもとに分子系統学的な解析を行った結果、Cnvas1とCnvas2は、DEADボックスRNAへリカーゼのなかでも、vasa類縁遺伝子のみが含まれるVasサブファミリーに分類され、CnPL10はそれとは別のPL10サブファミリーに属することが確認された。また、Cnnos1とCnnos2がコードすると推定されるタンパク質は、他のNanos類縁タンパク質の間でよく保存されている2つのジンクフィンガーモチーフの部分が完全に保存されていたことから、nanos類縁遺伝子のメンバーであることが強く示唆された。\u003cbr /\u003e　次に、正常ヒドラを用いて、ホールマウントin situハイブリダイゼーションにより上記の5つの遺伝子の発現を調べた。そのうちCnvas1、Cnvas2、Cnnos1のmRNAは、オスでは体軸方向につながった、メスでは塊になった大型間細胞で強く発現しており、これらはその形態から生殖細胞であると考えられた。また、この生殖細胞と考えられる発現の強い細胞の他に、発現の弱い大型間細胞が体幹部に散らばっており、これらは多能性幹細胞であると考えられた。一方、CnPL10のmRNAは大型間細胞のほかに刺細胞の前駆細胞でも検出され、その発現は生殖系列細胞に特異的ではなかった。また、Cnnos2のmRNAは一部の生殖細胞で弱く、口丘の内胚葉で強く発現していた。これらの結果から、Cnvas1、Cnvas2、Cnnos1の3つの遺伝子の発現は生殖系列細胞のマーカーになる可能性があることが分かった。\u003cbr /\u003e　さらに、上皮細胞と腺細胞の他には生殖細胞のみが存在する偽上皮ヒドラを用いて、Cnvas1、Cnvas2、Cnnos1のmRNAの遺伝子の発現を調べたところ、いずれの遺伝子の発現も大型間細胞つまり生殖細胞で強く発現していた。染色された細胞はオスでは体軸方向につながっており、メスでは数ヵ所で塊になっていた。これらは、正常ヒドラのオスおよびメスの強く染まる細胞の形態とよく一致しており、正常ヒドラで強く染まる細胞は生殖細胞であることが、さらに強く示唆された。また、正常ヒドラで刺細胞系列のマーカーを用いて2重染色をおこない、これらの遺伝子が刺細胞系列では発現していないことも確かめた。\u003cbr /\u003e　以上のことから、Cnvas1、Cnvas2、Cnnos1のmRNAの発現は生殖細胞と多能性幹細胞に特異的であり、相対的に生殖細胞ではその発現は強く、多能性幹細胞では弱いことが分かった。よって、Cnvas1、Cnvas2、Cnnos1のmRNAの発現は、ヒドラの生殖系列細胞の発生、分化を研究する上で有効なマーカーである。", "subitem_description_type": "Other"}]}, "item_1_description_7": {"attribute_name": "学位記番号", "attribute_value_mlt": [{"subitem_description": "総研大甲第470号", "subitem_description_type": "Other"}]}, "item_1_select_14": {"attribute_name": "所蔵", "attribute_value_mlt": [{"subitem_select_item": "有"}]}, "item_1_select_8": {"attribute_name": "研究科", "attribute_value_mlt": [{"subitem_select_item": "生命科学研究科"}]}, "item_1_select_9": {"attribute_name": "専攻", "attribute_value_mlt": [{"subitem_select_item": "18 遺伝学専攻"}]}, "item_1_text_10": {"attribute_name": "学位授与年度", "attribute_value_mlt": [{"subitem_text_value": "1999"}]}, "item_1_text_20": {"attribute_name": "業務メモ", "attribute_value_mlt": [{"subitem_text_value": "（2018年2月20日）本籍など個人情報の記載がある旧要旨・審査要旨を個人情報のない新しいものに差し替えた。承諾書等未確認。要確認該当項目修正のこと。"}]}, "item_creator": {"attribute_name": "著者", "attribute_type": "creator", "attribute_value_mlt": [{"creatorNames": [{"creatorName": "MOCHIZUKI, Kazufumi", "creatorNameLang": "en"}], "nameIdentifiers": [{"nameIdentifier": "10016", "nameIdentifierScheme": "WEKO"}]}]}, "item_files": {"attribute_name": "ファイル情報", "attribute_type": "file", "attribute_value_mlt": [{"accessrole": "open_date", "date": [{"dateType": "Available", "dateValue": "2016-02-17"}], "displaytype": "simple", "download_preview_message": "", "file_order": 0, "filename": "甲470_要旨.pdf", "filesize": [{"value": "273.2 kB"}], "format": "application/pdf", "future_date_message": "", "is_thumbnail": false, "licensetype": "license_11", "mimetype": "application/pdf", "size": 273200.0, "url": {"label": "要旨・審査要旨 / Abstract, Screening Result", "url": "https://ir.soken.ac.jp/record/955/files/甲470_要旨.pdf"}, "version_id": "f7cc0b0b-382d-4fda-b1ab-325eb855c3e6"}]}, "item_language": {"attribute_name": "言語", "attribute_value_mlt": [{"subitem_language": "jpn"}]}, "item_resource_type": {"attribute_name": "資源タイプ", "attribute_value_mlt": [{"resourcetype": "thesis", "resourceuri": "http://purl.org/coar/resource_type/c_46ec"}]}, "item_title": "ヒドラの生殖系列細胞に対する分子マーカーの単離と発現解析", "item_titles": {"attribute_name": "タイトル", "attribute_value_mlt": [{"subitem_title": "ヒドラの生殖系列細胞に対する分子マーカーの単離と発現解析"}]}, "item_type_id": "1", "owner": "1", "path": ["20"], "permalink_uri": "https://ir.soken.ac.jp/records/955", "pubdate": {"attribute_name": "公開日", "attribute_value": "2010-02-22"}, "publish_date": "2010-02-22", "publish_status": "0", "recid": "955", "relation": {}, "relation_version_is_last": true, "title": ["ヒドラの生殖系列細胞に対する分子マーカーの単離と発現解析"], "weko_shared_id": 1}